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三乙胺作氰基轉(zhuǎn)移劑活化Sepharose4B制備免疫吸附劑
作者：瑞達(dá) 日期： 點(diǎn)擊: 次
我們根據(jù)kohn等人的報(bào)道，用三乙胺作氰基轉(zhuǎn)移劑，將溴化氰的氰基轉(zhuǎn)移到瓊脂糖珠上。方法簡(jiǎn)述如下：經(jīng)丙酮洗滌后的Sepharose4B在-15℃先加入三乙胺(最終克分子濃比度為溴化氰：三乙胺=1:1.5)，再經(jīng)洗滌劑及丙酮洗滌后得活化的Sepharose4B，后者既與配基偶聯(lián)，裝柱即得親和層折柱。該活法化步驟在PH中性的反應(yīng)液中進(jìn)行，所需溴化氰為常規(guī)方法用量的5%，活化后的瓊脂糖珠偶聯(lián)率很高(97%)，偶聯(lián)度為10.9mg/ml，且操作簡(jiǎn)單安全，解析產(chǎn)物純度活性均較好，經(jīng)反復(fù)親和層折，證明此法效果可靠。
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