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RP-HPLC定量三乙胺法測(cè)定中藥黃連中鹽酸小檗堿的含量
目的:建立一種反向高效液相色譜(RP·HPLC)法測(cè)定黃連中鹽酸小檗堿的含量。方法:采用HPLC法,色譜柱為L(zhǎng)unaC18柱(150mm×4.60mill,5m),流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸(25:75),每lOo0ml0.1%的磷酸溶液中加入50txl的三乙胺(掃尾劑)進(jìn)行洗脫;檢測(cè)波長(zhǎng)為340nm。結(jié)果:采用HPLC法檢測(cè)黃連中鹽酸小檗堿的含量,其在0.246—2.460ixg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。平均加樣回收率為100.1%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.60%。結(jié)論:HPLC簡(jiǎn)便可行、重復(fù)性好,可作為檢測(cè)鹽酸小檗堿含量的質(zhì)量控制;一定量的三乙胺分析純可作為很好的掃尾劑,用于鹽酸小檗堿的含量測(cè)定。[關(guān)鍵詞]黃連;鹽酸小檗堿;高效液相色譜黃連為毛茛科植物黃連(coptischinensisfranch)、三角葉黃連(CoptisdehoideaC.Y.ChenetHsiao)或云連(CoptisteetaWall1.)的干燥根莖,主要含有小檗堿、黃連堿、藥根堿、甲基黃連堿等生物堿成分,其中以小檗堿含量最高J!吨袊(guó)藥典》(2005年版)中測(cè)定黃連中小檗堿含量的方法主要為薄層色譜法j。此外,采用高效液相色譜(HPLC)法可更加精確鑒定黃連中鹽酸小檗堿及其含量。鹽酸小檗堿(Berberine)為非處方藥,具有廣泛的藥理作用。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn),在體外該類化合物濃度在每毫升微克級(jí)水平時(shí),可抑制人白血病K562細(xì)胞、食管癌YES細(xì)胞、肝癌HepG2細(xì)胞、結(jié)腸癌colon26/colon20細(xì)胞、人早幼粒白血病HL一60細(xì)胞、人胃癌SGC一7901細(xì)胞、鼻咽癌CNE一2Z細(xì)胞等多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),促進(jìn)人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞、人胃癌細(xì)胞MGC一803和SGC一7901的分化,誘導(dǎo)人胃癌MGC一803和BGC823細(xì)胞凋亡3J,促進(jìn)Hela細(xì)胞凋亡j。作者首次使用反向高效液相色譜(RP—HPLC)法測(cè)定黃連中鹽酸小檗堿的含量,為控制黃連藥材、黃連提取物中間固體和鹽酸小檗堿片的質(zhì)量提供參考。
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